Olympus FV3000 共聚焦激光扫描显微镜用户手册

FLUOVIEW FV3000 Confocal Laser Scanning Microscope User’s Manual Olympus Corporation,2016年5月发布(AX8788) 配套软件:FV31S-SW 标准图像采集分析软件

一、手册概述

本手册是奥林巴斯 FLUOVIEW FV3000 系列共聚焦激光扫描显微镜的官方用户手册,总292页,分为两大部分:

部分内容章节数页数
第一部分:安全手册激光安全、警告标签、技术规格3章约30页
第二部分:操作/维护手册系统概述、开关机、各部件操作、光学单元、观察方法、LSM操作、外部接口、维护、故障排除12章约90页

激光等级:Class 3B 激光产品 用途:生物医学研究用(Research use only) 配套软件:FV31S-SW 标准图像采集/分析软件 + 触摸面板控制器

二、FV3000 核心特性

  1. 高灵敏度光谱检测器 FV31-HSD — 高 S/N 比图像采集(GaAsP PMT)
  2. 光谱检测器 FV31-SD + HSD 双检测器配置 — 可同时采集不同波长图像,最多2个检测器组合
  3. 混合扫描单元 FV31-HSU — 高速成像
  4. 长时间时间序列成像稳定性 — 重复时间精度高,适合长时间延时观察
  5. TruSpectral 光谱检测技术 — 任意波长采集设置

三、检测器单元配置

FV3000 支持三种检测器单元,可灵活组合:

检测器类型型号特点
光谱检测器FV31-SD标准光谱检测
高灵敏度光谱检测器FV31-HSDGaAsP PMT,高 S/N
透射光检测器FV31-LETD透射光成像

组合方式:最多可安装2个检测器单元,SD 与 HSD 可任意搭配

四、系统组成与关键部件

4.1 核心扫描与检测单元

  • 主激光合束器 FV31-MCOMB(285×420×173mm,12.7kg)
  • 副激光合束器 FV31-SCOMB(285×420×173mm,11.0kg)
  • 光束轴合束器 FV31-BCOMB(102×129×76mm,0.86kg)
  • 扫描单元 FV31-SU / FV31-HSU(混合扫描单元)
  • 光谱检测器 FV31-SD / FV31-HSD

4.2 显微镜主体

  • IX83 2口镜架 IX83P2ZF(323×474.7×360mm,18.7kg)
  • 控制箱 IX3-CBH(294.5×100×214mm,4.2kg)
  • 触摸面板控制器(211×190×105mm,2.6kg)
  • 控制器 U-MCZ

4.3 载物台

  • 超声波载物台 IX3-SSU(高速高精度)
  • XY控制器(附于IX3-SSU)

4.4 激光系统

  • 系统电源 FV31-PSU
  • 激光器:405nm / 445nm / 488nm / 514nm / 561nm / 594nm / 640nm 多线可选
  • 激光合束器间光纤单元 FV31-CCFUR(光纤长3000mm)

4.5 辅助设备

  • Z漂移补偿器 IX3-ZDC2
  • 汞灯光源 U-HGLGPS
  • IO接口盒 FV30-ANALOG(模拟输入/同步信号输出)
  • 电动荧光镜塔 FV30-RFACA

五、开关机完整流程

5.1 开机顺序(Operation)

  1. 打开控制单元和显示器主开关 → ON
  2. 打开控制箱 IX3-CBH 主开关 → ON
  3. 打开系统电源 FV31-PSU 主开关
  4. 打开主激光合束器 LD 电源 AC 适配器主开关
  5. 打开副激光合束器 OBIS 6 Laser Remote LD 电源 AC 适配器主开关
  6. 将 OBIS 6 Laser Remote 启动钥匙顺时针旋转 → 启动激光
  7. 启动 FV31S-SW 软件(双击桌面图标)
  8. 根据需要设置载物台配置

5.2 关机顺序(Operation)

  1. 通过 FV31S-SW 软件取消所有激光勾选
  2. 将 FV31-PSU 启动钥匙设为 OFF
  3. 将主激光合束器 OBIS 6 Laser Remote 启动钥匙逆时针旋转 → STAND BY
  4. 将副激光合束器 OBIS 6 Laser Remote 启动钥匙逆时针旋转 → STAND BY
  5. 关闭主激光合束器 LD 电源 AC 适配器主开关
  6. 关闭副激光合束器 LD 电源 AC 适配器主开关
  7. 关闭系统电源 FV31-PSU 主开关 → OFF

关键原则:开机从下到上(先电源后激光),关机从上到下(先激光后电源)

六、安全注意事项

6.1 激光安全(Class 3B)

  • 激光安全官(LSO):必须指定专人负责激光安全管理
    • 制定激光伤害预防措施
    • 设置和管理激光控制区域
    • 管理启动钥匙
    • 检查维护激光设备和防护工具
    • 开展安全教育培训并记录
  • 激光控制区域:放置警告标志(含LSO姓名/激光危害说明/激光设备标志)
  • 远程互锁:FV31-PSU 配备外部互锁连接器(30mA / 24V),可连接门互锁
  • 防护眼镜:波长匹配(405/445/488/514/561/594/640nm),OD值≥3
  • 眼科检查:使用 Class 3B 激光的人员应定期进行眼底检查

6.2 系统安全功能

  1. 钥匙启动 — FV31-PSU 配备启动钥匙,非使用时由LSO保管
  2. 辐射指示灯 — 激光发射时LED点亮(两个灯箱:物镜端 + 软件端各一,距尖端≤2m)
  3. 光束阻挡与衰减器 — 内置快门,目视观察时防止激光进入眼睛
  4. 光束终端 — 设计防止激光从 IX83 镜架或激光合束器意外泄漏

6.3 其他安全

  • 运输与改装:必须由奥林巴斯工程师执行,用户自行移动导致的安全问题厂家不负责
  • 废弃处理:汞灯按工业废物处理;触摸面板锂电池联系奥林巴斯;GaAsP-PMT含砷化合物需专业废弃
  • 电磁兼容:IEC/EN61326-1 Class A(工业环境)

七、主要操作部件

7.1 物镜系统

  • 电动鼻轮:可切换多个物镜
  • 浸没物镜:油浸 / 硅油 / 水浸物镜使用方法
  • 校正环物镜:覆盖玻片厚度校正

7.2 观察筒

  • 瞳距调节、视度调节、眼罩使用、目镜测微尺
  • 三目镜筒光路选择、倾斜调节(U-TBI90)

7.3 聚光镜系统

  • 聚光镜安装、光学元件安装、聚光镜居中
  • 孔径光阑使用

7.4 Z漂移补偿器 IX3-ZDC2

  • 焦点限制设置
  • 盖玻片类型/厚度设置
  • ZDC 远限设置
  • 两种模式:焦点搜索模式 / 连续聚焦模式

八、观察方法

8.1 反射荧光观察

  • 荧光镜单元选择
  • 汞灯点亮/熄灭/亮度调节
  • 电动荧光镜塔 FV30-RFACA 转盘选择

8.2 相差观察

  • 相差光学元件与适用物镜
  • 相差环缝居中

8.3 微分干涉(DIC)观察

  • DIC 光学元件与适用物镜 / DIC 滑板
  • 检偏器与 DIC 滑板安装
  • 正交尼科耳(Cross-Nicol)调节

8.4 简易偏光观察

  • 检偏器与起偏器安装

8.5 同时荧光观察

  • 反射荧光 + 相差 同时观察
  • 反射荧光 + DIC(透射)同时观察

8.6 LSM 观察

通过 FV31S-SW 软件操作(详细操作见软件在线帮助)

九、外部设备信号连接(FV30-ANALOG)

9.1 IO接口盒功能

  • 模拟电压输入(外部设备信号采集)
  • 同步信号输出(触发外部设备)

9.2 同步信号类型

  • 多种扫描模式的同步输出时序
  • LOOP 信号输出时序
  • 支持与外部设备(如电生理、刺激设备)同步

十、维护与故障排除

10.1 预防性检查

  • 照明设备定期检查清单

10.2 保养与存放

  • 日常维护要点

10.3 故障排除指南

  • LSM 观察故障(第12-1节)
  • 目视观察故障(第12-2节)

十一、相关笔记

十二、关键数据速查

项目参数
激光等级Class 3B
激光波长405 / 445 / 488 / 514 / 561 / 594 / 640 nm
检测器类型FV31-SD(光谱)/ FV31-HSD(高灵敏度GaAsP)/ FV31-LETD(透射)
扫描单元FV31-SU(标准)/ FV31-HSU(混合高速)
显微镜底座IX83 倒置显微镜
软件FV31S-SW
Z漂移补偿IX3-ZDC2
外部接口FV30-ANALOG(模拟输入 + 同步输出)
防护眼镜OD值≥3
互锁接口30mA / 24V

本笔记为用户手册核心知识提炼,具体操作步骤以原手册和软件在线帮助为准。