流式质谱资料整合-试剂部分（免疫标记试剂技术方案）
基本信息
- 文件来源: XXX项目本子-20170919/修改/20170925
- 文件类型: .pptx（演示文稿）
- 页数: 7页
- 整理日期: 2026-09-20
主题概述
本资料介绍了流式质谱技术中的免疫标记试剂技术方案，重点研究稳定配位物和单分散聚合物，实现荧光和质谱双模标记。
关键技术路线
1. 稀土配位物的笼状化合物合成
采用固相合成技术，开发稀土配位物的笼状化合物：
- 基于Eu³⁺的稀土配合物结构
- 两类稀土配位物的合成方法
- 固相生产技术在工业化中的应用
合成工艺特点：
- 带衍生基团的二联吡啶首先固定在王氏树脂上
- 在金属离子的模板化螯合下，溶液里的另外两个二联吡啶可与之反应
- 高效形成所需笼状配位化合物
- 通过氢化解离得到所需产品
这是该类配位化合物合成工业化生产的关键技术条件。
2. 单分散聚丙烯酸酯类聚合物合成
采用链转移聚合技术，合成单分散聚丙烯酸酯类聚合物：
- 为了有效提高质谱和荧光信号的灵敏度
- 采用聚合物分子链标记稀土配位物的方法
- 采用可逆加成断裂链转移聚合（RAFT）合成的嵌段聚合物为多单分散聚合物
- 保证质谱信号的一致性
3. 高效抗体偶联标记技术
采用可控制的高效偶联标记技术，实现抗体与金属标签的定量标记：
- 嵌段共聚物链端的R₂结构可以和抗体（或蛋白、受体等）的巯基快速简便连接
- R₂链的长度和种类是关键影响因素
- R₂结构可以是多种设计（如图示几种）
稀土配位物发光原理
稀土元素的荧光性质：
- 荧光寿命长
- 量子产率高
- 斯托克斯位移大
- 发射峰狭窄
双模检测优势：
- 蓝色为生物物质激发自体荧光
- 红色为稀土配合物激发荧光
- 当经过一定延迟时间后再对荧光进行检测，可以避免自体荧光的干扰
Tb³⁺配合物作为供体标记物
- Tb³⁺配位化合物3可以和蛋白、多肽或其他带羧基的生物识别对象进行偶联
- 该化合物通常作为供体标记物
- 在药物高通量筛选中得到广泛应用
抗体标记流程图
- 稀土配位物合成 → 单分散聚合物合成 → 抗体标记
- 三个关键步骤形成完整的技术方案
应用价值
- 荧光检测：利用稀土配合物的长荧光寿命和窄发射峰，避免背景干扰
- 质谱检测：金属标签提供高质量特异性信号
- 双模标记：同一标记物可实现荧光和质谱双重检测
- 定量标记：高效偶联技术确保抗体与金属标签的定量连接