流式细胞仪试验大纲 20161130
本份大纲由苏州国科医疗发展有限公司于 2015 年 10 月编制(latest 版本 1.0典型2016 年 11 月),对共聚焦液相芯片项目流式细胞仪的整机试验流程和功能测试用例进行了系统定义。这是中流式细胞仪工程化结题中的关键文档之一,承接 流式细胞仪执行情况b11_planning-2017年7月Sprint11收尾快照 所反映的 Sprint1-11 滚动计划,并跟据该表中的多项测试条目进度制定。
试验目标与范围
- 明确流式细胞仪各模块功能
- 确保系统符合 FCS(Flow Cytometry Standard)标准要求
- 为后续工程化验证提供可靠依据
- 安全目标、环境试验与电磁兼容性不在本大纲范围
关键术语
- 设门:通过界限定义并可以进一步检验的颗粒子集
- 通道:流式细胞仪可选择的数据通道
- 参数:从探测器收集的散射/荧光面积、高度、宽度测量值
- 对数(Log)标尺:幂指数划分标尺,适合荧光参数
- 补偿:针对光谱叠加纠正多参数的数学过程
- 自发荧光:细胞自身结构产生的天然荧光
- 前向角散射(FSC):与细胞大小相关
- 侧向角散射(SSC,90°):对胞膜/胞质/颗粒折射率敏感
- 标准微球:大小一致/标记荧光素一致,用于仪器校准
试验内容结构
初始化测试(三大方向)
- 单构件初始化:Z/X/Y 轴电机 + 摇匀电机
- 液路初始化:泵初始化(含在整体初始化中)
- 设备排空:液路排气泡
模块测试(样本区 + 测量区)
条目划分:样本区 1-6(X/Y 移动、定样本点、上样本、下样本、摇匀),测量区 13-17(开始测量、停止测量、压杯、清洗、拍气泡)。
样品组件功能测试
- 9 步流程:初始化 → 强制停止 → 设置 X/Y 点位坐标 → 设置点数 → 摇匀 → 定向取样 → 取样 → 下样
- 测试要求:仍重复 10 次全流程,10 次全部成功为通过
测量组件测试
- 光学测试模块:反应杯为空时设定参数后进行光学测量
- 重复 20 次测试,统计 CV 值变化,CV < 限定值则通过
系统功能测试关键指标
4.1 反应区温度稳定性与波动性
- 温度准确度:±0.5°C
- 温度波动:≤1.0°C
- 测量方法:最小采样间隔 30s,采集 10min,平均值与设定值之差为准确度,最小最大值之差为波动
4.2 仪器稳定性
- 4h/8h 测试结果与初始测试结果的相对偏倚不超过 ±10%
- 重复 3 次测量取均值,以初始均值作基准
4.3 批内重复性
- CV ≤ 8%(国家标准)
- 同一含精密度样本采集20 次重复性数据计算 CV
4.4 线性相关性
- ≥ 0.99(不小于 2 个数量级浓度范围)
- 至少 5 个不同浓度样本,每个测 3 次取均值
- 以浓度为自变量,测值均值为因变量拟合线性回归
4.5 携带污染率
- ≤ 10⁻⁵
- 测法:高浓度样本 A原(至少是最低检出限 10⁵ 倍)→ 高/高/高/零/零/零 序列为 1 组,共 5 组
- 计算公式:(A6 - A4) / A原 × 100%(最大值需符合 4.5 规定)
4.6 液装载量
- 洗涤液一次装载可完成 ≥2000 次测试
系统软件测试(七大功能模块)
初始化管理、模块测试、系统测试、样本设置、采集数据、数据分析 + 系统基本服务。
测试用例:
- 人机对话指令驱动不同样本/项目的完整测试
- 耗材及废料状态提示
- 故障提示(操作失误、机械电路问题)
- 开机自检反馈工件状态
- 液位、温度动态显示
- 系统参数设置(基连/用户/服务)
- 补偿参数自动调整
关联
- 流式细胞仪执行情况b11_planning-2017年7月Sprint11收尾快照
- 流式细胞仪情况b9_planning-2017年6月Sprint9收尾快照
- 流式细胞仪执行情况b8_planning-2017年2-6月Sprint1-8
- 流式细胞仪项目整理-进度缩影
- 荧光补偿算法接收处所-工程化流式仪器
备注
- 文档定义值”批内 CV ≤ 8%“为国标最低要求,工程化目标实际要求更为严格(立式产品线约束)
- 本大纲先后由此表中的”流式细胞仪测试计划 25000.51”所采用和执行