共聚焦显微镜操作软件需求说明(扫描采集)

该文档是基于当前共聚焦显微镜已有功能的基础上,针对不同扫描模式的操作需求而撰写的分析报告。

一、概述

共聚焦显微镜具有多种扫描方式,用以满足不同情境下对图像质量、采集速度、图像时间序列、图像光谱序列的不同需求。

扫描方式可划分为:

  • 常规扫描:XY平面扫描、XYZ光轴扫描、XYt时间序列扫描、XYλ光谱扫描、大图扫描
  • 快速扫描
  • ROI扫描

二、主要功能

2.1 硬件信号通路

以XY平面扫描为例:

激光器 → 光路 → 被测目标 → 光路 → PMT采集

执行扫描过程中需要操作的底层硬件:

  • 若干激光器:设置与使用状态
  • 对应PMT:设置与使用状态
  • 被测目标位置:位移台调整

2.2 采集流程

  1. 开始采集时,根据所选择的通道和采集频率实时获得采集信号
  2. 采集频率通过控制振镜扫描机构的旋转速度来实现
  3. 多通道采集出的图像需要融合成为一整幅预览图像,需要图像预处理功能

2.3 数据流关键环节

配置完硬件采集逻辑后,需要针对采集到的数据进行**展示和管理。

2.4 UI布局(分区示意)

  • 模式设置区:实现不同模式状况下,对采集各环节中的整体需求

三、六种扫描模式详细对比

扫描模式特有参数共有参数硬件控制备注
XY扫描帧频率通道选择 / 激光器配置 / PMT配置 / 结果保存路径振镜扫描控制焦平面扫描,基础模式
XYZ扫描Z轴起点 / Z轴终点 / 切片数 / 步长 / 激光强度自适应调节帧频率 / 通道选择 / 激光器配置 / PMT配置 / 结果保存路径振镜扫描控制 + Z轴移动断层扫描,向导式配置
XYt扫描扫描间隔 / 扫描时长帧频率 / 通道选择 / 激光器配置 / PMT配置 / 结果保存路径振镜扫描控制时间序列,测动态变化
XYλ光谱扫描起始波长 / 终止波长 / 光谱宽度 / 扫描步长 / λ光谱步长帧频率 / 通道选择 / 激光器配置 / PMT配置 / 结果保存路径振镜扫描控制不同光谱波段扫描
大图拼接扫描序号 / 扫描x位置 / 扫描长度 / 扫描y位置 / 扫描宽度 / 拼接算法帧频率 / 通道选择 / 激光器配置 / PMT配置 / 结果保存路径振镜扫描控制 + 图像拼接小区域扫描后拼接成大图
多点扫描扫描序号 / 扫描x位置 / 扫描长度 / 扫描y位置 / 扫描宽度帧频率 / 通道选择 / 激光器配置 / PMT配置 / 结果保存路径振镜扫描控制暂无设计,优先级调后

四、各扫描模式详解

4.1 XY扫描

针对焦平面上的物体,通过扫描的方式来实现成像。

核心配置:

  • 通道选择
  • 激光器配置
  • PMT配置
  • 光路配置(体现为扫描频率)
  • 图像数据输出地

4.2 XYZ扫描

在XY扫描基础上,增加Z轴移动策略配置,实现对Z轴每一个平面的扫描,为断层扫描提供基础。

核心配置(额外增加:Z轴移动管理 配置方式:向导方式

4.3 XYt扫描

在一段时间内,按照一定时间间隔,不断扫描该时间序列内焦平面上的物体,以测得在该周期内的动态变化图像。

与XY扫描相比,增加了时间序列的设置参数。

4.4 XYλ光谱扫描

根据激光器的谱段不同而进行扫描。在不同光谱波段下扫描相同焦平面,可以产生不同波段对应的图像结果,从而分析其光谱扫描效果。

与XY扫描模式不同的是,增加了光谱波段的选择设置。

4.5 大图拼接

通过焦平面的再度分割成若干小区域,通过快速扫描获得小区域图像,再**拼接成完整的焦平面图像。

相较于XY扫描,需要对扫描范围重新规划:

  • 振镜的扫描范围和起始点都做设置
  • 直接将结果做好拼接

4.6 多点扫描

优先级暂时调后,目前无设计。

五、关键概念

  • 帧频率:振镜扫描速度决定,影响采集速度与图像质量的权衡
  • 通道选择:多通道同时采集,需图像融合
  • 激光强度自适应调节:XYZ扫描中与Z轴位置有关的激光强度调整
  • 图像预处理:多通道图像融合为预览图像
  • 拼接算法:大图拼接模式的核心算法模块

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