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- 来源: /工作相关/Personnal/2017工作/质谱相关/CyTOF®2 质谱流式细胞仪介绍.pdf
- 文件大小: 2.21 MB
- 页数: 21 页
- 类型: 产品介绍/PPT讲义
核心内容
一、技术革命性突破
CyTOF®2 质谱流式细胞仪是流式细胞技术领域的一次革命,使用金属元素作为抗体/染料标签,利用ICP(电感耦合等离子体)质谱技术进行检测。
二、五大产品优势
1. 上百个独立检测通道
- 检测原子量范围: 88~210 Da
- 通道数 > 100
- 相比传统荧光流式(通常10-20个通道)的质飞跃
2. 全新概念金属标签
- 仅镧系金属即可提供32种标记物
- 金属标记物与细胞非特异结合极弱
- 细胞中天然金属含量极低,背景信号低
3. 通道间无干扰
- 相邻通道影响 < 0.3%,基本可忽略
- 无需补偿计算
- 节约样品消耗
- 无需各通道单染对照
4. 高灵敏度和高稳定性
- 可检测500个抗体分子
- 各通道灵敏度相似
- 不同时间检测结果CV < 3%
5. 多元化数据分析方法
- PCA(主成分分析)
- SPADE(树状图分析)
- Heatmap(热图)
- viSNE(t-SNE降维可视化)
三、与传统荧光流式对比
| 特性 | 传统荧光流式 | CyTOF®2 |
|---|---|---|
| 通道数 | 10-20个 | >100个 |
| 光谱重叠 | 严重 | 无 |
| 补偿计算 | 需要复杂计算 | 无需 |
| 样品消耗 | 大 | 小 |
| 灵敏度差异 | 各通道差异大 | 相似 |
| 背景噪声 | 较高 | 低 |
四、主要应用领域
1. 复杂细胞群体精细分群
- CD8+ T细胞25个Marker表达分析
- 骨髓13个表面Marker viSNE降维分群
2. 信号通路研究
- 观察已知细胞亚群内在联系
- 自动聚群、归类
- 寻找新的细胞亚群
3. 疾病个体差异研究
- 白血病、淋巴癌等
- T细胞功能多态性
4. 高通量药物筛选
- MCB(mass-tag cellular barcoding)技术
- 一次检测96个不同样品
- 组合标记各孔细胞
- 根据标记组合追溯样品来源
五、配套试剂
- MaxPar® 金属标签抗体
- MaxPar® Panel 试剂盒
- MaxPar® 金属标记试剂盒
- 金属标签核酸嵌合剂
六、应用关键词
- 血液: 白血病、淋巴瘤、造血发生
- 干细胞: 自我更新、肿瘤干细胞、iPS
- 免疫: 淋巴细胞、T/B细胞成熟
- 药物筛选: 高通量、信号通路
关键要点
- CyTOF®2 的核心优势是”多参数”和”无光谱重叠”
- 适合需要同时检测数十个甚至上百个蛋白标记的实验
- MCB技术可实现96样本高通量检测
- 数据分析方法灵活,可根据实验目的选择